Preparación de muestras

La Microscopía electrónica de barrido, precisa, en algunas ocasiones, de la colocación de las muestras en portas de microscopía electrónica, con su correspondiente fijación en los mismos mediante material homologado para tal fin.

Preparación de muestra sencilla, normal y compleja según requisitos del análisis.

Inclusión de muestras en distintas resinas y su posterior corte para distintos microscopios, tanto ópticos como electrónicos

Toma de muestras de suelos y vegetales, preparación para análisis y toma de parámetros agronómicos

Preparación de muestras sólidas material vegetal, suelos y sedimentos.
El procesado de muestras de suelo y sedimentos incluye secado, tamizado y pulido con mortero.
La preparación de muestras vegetales incluye el secado, tamizado y pulido con molino de bolas o de cuchillas.
Preparación de frotis de sedimentos para la observación al microscopio petrográfico. El medio de fijación utilizado es el mismo que el empleado en láminas delgadas geológicas y el sellado se realiza mediante exposición del porta a luz UVA.

Disolución de las muestras en el correspondiente disolvente deuterado, para poder llevar a cabo los análisis de RMN.

Preparación de la muestra con suministro del vial necesario para la misma, en caso de que el usuario no pueda proporcionarlo (únicamente para usuarios externos).

Preparación de muestras en bruto para su análisis cromatográfico.
Entre otras, puede incluir las siguientes tareas:
- Extracciones
- Disoluciones
- Diluciones
- Derivatizaciones-

Preparación de muestras en soportes con discos de carbon para SEM (autoservicio)

Preparacion de muestras mediante la técnica Spark Plasma Sintering. a tecnología SPS es utilizada para sinterizar/densificar polvos a alta velocidad, siendo posible procesar tanto materiales conductores como no conductores. Las temperaturas utilizadas son entre 200 y 500°C menores que las utilizadas por los métodos convencionales de sinterización. El procesamiento del material (presión uniaxial, rampas de calentamiento y estabilización de la temperatura) se realiza muy rápido, entre 5 y 25 minutos. Las relativamente bajas temperaturas, junto con el corto tiempo de procesamiento, permite tener un control sobre el crecimiento de grano y la microestructura. Existen numerosas teorías sobre este proceso, la más aceptada se basa en el concepto de micro chispa/plasma que se produce en la superficie de contacto entre las partículas por el paso de pulsos de corriente continua de alta intensidad y bajo voltaje.
El equipo utilizado es DR. SINTER SPS-1050-CE
Características Técnicas:
¿ Voltaje de 2-12 V
¿ Corriente de 0-5000 A
¿ Carga aplicable

Preparación de muestras para el análisis cromatográfico (LC-MS / GC-MS):
- Centrifugación
- Filtración
- Dilución
- Derivatización

Se pueden entregar las muestras para su preparación total (secado, tamizado y molienda) en el Servicio de Análisis e Instrumentación. Así mismo, también podrán entregarse suelos que previamente hayan sido secados y tamizados por los solicitantes y realizar en el Servicio de Análisis e Instrumentación la molienda del suelo.

Preparación de muestras de fauna para análisis de isótopos.

Las muestras biológicas presentan una serie de características que hacen necesario el empleo de protocolos de preparación para su observación mediante microscopía electrónica de barrido.
- Alto contenido en agua
- Mala conductividad electrónica
- Estructuras internas que para su observación requieren tratamientos que las dejen expuestas para poder ser observadas
Los protocolos generales de preparación de muestras para su observación en el Microscopio Electrónico de Barrido llevados a cabo en el Servicio son:
1. Protocolos de Fijación: En función de las características de la muestra se procede a la elección del método de fijación más adecuado así como a la optimización de las condiciones de fijación.
2. Protocolos de Rehidratación: Muy utilizados en las muestras secas procedentes de Herbario.
3. Protocolos de Deshidratación: Según las características y el tipo de material biológico se procede a la inmersión de la muestra series alcoholicas o acetónicas en concentraciones crecientes, optimizando la duración del procedimiento en cada caso.
4. Protocolos de Secado: Elección del procedimiento de secado más adecuado según el tipo de muestra. Ver prestación denominada "Tratamiento muestra: Secado"
5. Montaje de la muestra en los portamuestras teniendo en cuenta la correcta orientación de las superficies a estudiar.
6. Protocolos de Recubrimiento: Deposición de una delgada capa de metal favoreciendo la conductividad electrónica. Ver prestación denominada "Metalización (Sputtering)"
Para la preparación de muestras es necesario contactar con el técnico responsable (microbarrido@rjb.csic.es). La utilización de los equipos será llevada a cabo por el técnico del servicio.

SPS emplea la corriente eléctrica como activadora de los procesos de sinterizado, combinada con la aplicación directa de presión. El calentamiento por efecto Joule proporciona altas velocidades de calentamiento, lo que permite obtener cerámicas densas con un calentamiento uniforme. El funcionamiento del SPS consiste en un dispositivo de presión uniaxial, en el que los pistones actúan simultáneamente como electrodos, una cámara de reacción en vacio, un generador de corriente continua pulsada (dc) y sistemas de regulación de presión, posición y temperatura. En un experimento de SPS, se introduce una cantidad de polvo en un molde de diversos materiales, como grafito, etc. Uno de los principales intereses de este proceso, radica en la extrema rapidez del tratamiento térmico, reduciéndose el tiempo, de horas, en el caso del sinterizado convencional, a pocos minutos para el proceso SPS. La temperatura de consolidación disminuye en comparación con el sinterizado convencional.

La preparación estándar de las muestras consta de las siguientes
fases: fijación (glutaraldehido)-deshidratación (acetona), secado al punto crítico, montaje en stubs y metalización con oro-paladio. Es conveniente que el interesado esté presente durante el montaje de las muestras en los stubs.

Preparación de la muestra para su posterior análisis cromatográfico mediante HPLC-PDA, distinguiendo en función de la muestra:
- Liofilización, secado, tamizado y extracción con solventes orgánicos para muestras de suelo
- Extracción en fase sólida (SPE) en el caso de muestras de aguas, esta última sujeta a la disponibilidad de cartuchos apropiados para el compuesto a analizar.
Todas estas prestaciones están sujetas a las condiciones de uso descritas para el servicio.

-Preparación de muestras en resina bicomponente y pulido con juegos de lijas y paño, Selección y extracción de muestras de naturaleza y tamaño adecuados para su estudio en el SEM. Embutido de la muestra en resina bicomponente, incluyendo el desbastado y pulido mecánicos de la muestra mediante el uso de platos rotatorios con lijas de grano progresivamente más fino y paños con alúmina.
-Limpieza mediante baño ultrasónico de la muestra

Preparación de muestras con los reactivos y soportes disponibles en el SMOC
Para obtener más detalle consultar la página web: http://reactivos-smoc.cbmso.org/
Para su utilización contactar con el personal del SMOC:
Telf: 34-91 196 4643
E-mail: confocal-cbm@listas.csic.es

* Preparación de extractos de proteínas a medida: células, tejidos, bacterias, etc.
* Precipitación con acetona de los extractos de proteína obtenidos.

El Servicio de Preparación de Muestras del ICB dispone de la información, instalaciones, equipamiento y personal adecuado para hacer preparación de muestras, de acuerdo a normas internacionales.
El equipamiento disponible se compone de:
- Machacadoras, Trituradora de biocombustibles sólidos y Molinos de palas, palas centrífugos y cuchillas.
- Tamices certificados que permiten hacer granulometrías entre 100 micras y 2.5 cm.
- Sistemas para disgregación de muestras (fusión alcalina con Li2B4O7 o Na2O2, digestión ácida, etc.)
Dependiendo del tipo de muestra y análisis a realizar se utilizan distintos tipos de preparación de muestras:
- Molienda y preparación de la muestra de acuerdo a las normas ISO, UNE o EN correspondientes, disponiendo de las herramientas necesarias (trituradoras, molinos de cuchillas y palas, separadores y tamizadoras).
La digestión de muestras por ataque ácido o por fusión alcalina con Li2B4O7 o Na2O2 o por el Método Eschka ( ASTM D 3177) que consiste en disgregar la muestra con una mezcla de óxido de magnesio y carbonato sódico a 815ºC en crisol de porcelana.
Se realiza el análisis granulométrico entre 100 micras y 2.5 cm mediante tamizado con Tamices certificados.
Recubrimiento de muestras con una película de espesor controlado de oro pulverizado para su observacion en microscopia electronica de barrido