Análisis de compuestos: HPLC

El objetivo del Servicio de Instrumentación Científica (SIC) es proporcionar la infraestructura científica necesaria para los investigadores de la EEZ, ofreciéndoles soporte instrumental a la investigación científica y técnica, y asesoramiento sobre técnicas experimentales. Sus actividades principales son el análisis de muestras, la obtención de resultados analíticos, la interpretación de los mismos, y el asesoramiento científico-técnico. Este Servicio forma parte de la Red de Servicios Científico-Técnicos del CSIC.

El Servicio de cromatografía líquida (HPLC) y de gases (GC) del IBVF, es un servicio analítico desarrollado para la identificación de diversos tipos de metabolitos y su cuantificación. El Servicio cuenta con dos equipos de HPLC y dos equipos de GC. Actualmente el Servicio de Cromatografía desarrolla las siguientes aplicaciones: GC Esteres metílicos de Ácidos Grasos (FAMES) Etileno (Actividad Nitrogenasa) HPLC Aminoácidos (mediante derivatización con PICT realizada por el técnico) Ácidos orgánicos Etanol Carotenoides Nitratos Tioles Azúcares (monosacáridos, disacáridos) ADP-Glucosa Cianuros

Para una información completa consultar: http://www.ictan.csic.es/servicios/servicios-analiticos/ En la pagina web se describen tecnicas, equipos, tarifas y modo de acceso al Servicio. La Unidad se desglosa en 9 diferentes laboratorios tematicos: - Laboratorio de Espectrometría de masas - Laboratorio de Cromatografía General - Laboratorio de Análisis Elemental (metales y no metales) - Laboratorio de Caracterización y propiedades físicas (Textura; Ppdes térmicas) - Laboratorio de Instrumentación preparativa - Laboratorio de Espectroscopía - Laboratorio de Microbiología - Laboratorio de cultivos celulares - Calibración y Verificación de instrumentación analítica

De acuerdo con el método oficial de la Unión Europea, el material vegetal será sometido a diferentes procesos preparativos y extractivos: molienda, extracción de glucosinolatos en varias etapas y en condiciones que inactiven la enzima mirosinasa y desulfatación de los glucosinolatos mediante resinas de intercambio iónica y la enzima sulfatasa. La separación y cuantificación se realizará mediante cromatografía líquida en gradiente de acetonitrilo. La elección del patrón interno se realizará en función del origen de las muestras a analizar y se compararán los cromatogramas obtenidos con los correspondientes a los de 3 patrones de referencia (CRMs 366, 190 y 367).

Se trata de un servicio desarrollado para proporcionar herramientas básicas analíticas.

El Servicio de Cromatografía y Espectroscopia es una unidad multidisciplinar que dispone de un completo equipamiento cromatográfico, tanto para muestras volátiles (cromatografía de gases CG) como para muestras no volátiles (cromatografía de líquidos HPLC) así como de espectroscopia UV/Vis/NIR, FTIR, Raman, CD y VCD. El equipamiento disponible permite realizar determinación cualitativa y cuantitativa, así como estudios de quiralidad, de gran variedad de compuestos así como la caracterización de una gran diversidad de sustancias y materiales. El Servicio está dirigido tanto hacia sectores de investigación básica (academica o centros de investigación) como hacia la industria farmaceutica e industria química general (polímeros, pinturas, cerámicas, cosmética, aromas, petroquímica, etc.) e incluso sectores de la industria alimentaria, química forense o arqueología.

Análisis cualitativo y cuantitativo de metabolitos secundarios en plantas (fundamentalmente en crucíferas, maíz) mediante técnicas cromatográficas de alta eficacia (HPLC y UPLC). Los análisis pueden incluir así mismo la extracción y purificación parcial de los metabolitos previas a la determinación cromatográfica. Cuantificación de pigmentos (clorofila, carotenoides y antocianinas) y de la capacidad antioxidante de extractos vegetales mediante técnicas espectrofotométricas.

Se analizan los carbohidratos solubles y ácidos orgánicos en material vegetal como hojas, brotes y frutos de especies frutales, tanto de hueso como de pepita. La extracción de los carbohidratos y ácidos orgánicos se realiza siguiendo el método descrito por Font i Forcada et al. (2019). En fruta, se determinan los azúcares solubles: sacarosa, glucosa, fructosa y sorbitol, así como los ácidos orgánicos: málico, cítrico, quínico, shikimico y succinico, mediante HPLC y según su tiempo de retención característico. Su concentración es calculada mediante el programa de procedimiento integrado del software Millenium 3.2 después de realizar la calibración correspondiente y utilizando un patrón interno, lo que asegura la exactitud del método.

El Laboratorio de Cromatografía del Museo Nacional de Ciencias Naturales presta su asistencia a los departamentos de Investigación del Museo Nacional de Ciencias Naturales, así como a otros Institutos del CSIC y entidades públicas o privadas que lo soliciten. El Laboratorio de Cromatografía realiza determinaciones de diversos compuestos: contaminantes en suelo y agua, compuestos metabólicos y aniones en muestras de planta, así como algunos gases en muestras de atmósfera. Para la realización de la mayoría de estos análisis se utilizan protocolos de trabajo normalizados que comprenden tanto la preparación de la muestra como el análisis instrumental, basados, siempre que es posible, en normativas de organizaciones de reconocida solvencia.

El Servicio CT de Análisis de Aguas, Cuenta con la instrumentación e infraestructura necesaria para la realización de análisis físico-químicos e isotópicos en muestras líquidas, normalmente aguas naturales y, dependiendo de la técnica, extractos de material vegetal o suelos enfocadas al estudio de los ciclos biogeoquímicos. Entre las prestaciones ofertadas en este servicio destacan: 1_ el análisis de isótopos estables (δD y δ18O) mediante espectroscopia laser (Picarro L2130-i) con la técnica de “Cavity Ring-Down spectrometry (CRDS) y 2_el lector automatizado OMNILOG para la caracterización taxonómica y fisiológica de microorganismos en el ámbito de los estudios de ecotoxicología ambiental. Ambos equipos son de los pocos existentes en España de su categoría. Los análisis de iones mediante cromatografía iónica, de carbono orgánico total y nitrógeno total mediante combustión catalítica y la realización de estudiosde ecotoxicidad ambiental, son los más característicos d

El ACOS es un servicio de reciente creación en el IIM-CSIC debido a la concesión de una ayuda finaciada en la convocatoria EQUIPA 2021, para la compra de un Espectrómetro de Masas Tríbrido de Alta Resolución que se ha segregado del Servicio de Instrumentación Científica y Calidad (SICIM) en el Instituto de Investigaciones Marinas (IIM-CSIC) de Vigo. El instrumento solicitado permitirá realizar servicio de Proteómica Avanzada, Lipidómica y Metabolómica para muchos investigadores del IIM-CSIC, y de la comunidad científica gallega, Nacional y Norte de Portugal. A mayores el ACOS se hará cargo de los análisis cromatográficos que antes realizaba el SICIM utilizando HPLC (UV-VIS; Diodos; Light Scatering; Fluorimetría y espectrometría de masas) y GC con detectores FID y MS

El servicio de Purificación, análisis y caracterización (PAC) de compuestos químicos, es una instalación IQAC-CSIC creada en 2022 para dar soporte analítico a las actividades tanto internas en el propio centro como externas, ya sea, otros centros CSIC, empresas privadas, universidades y otras organizaciones públicas. PAC ofrece equipos para que los usuarios puedan trabajar en autoservicio.

El análisis riguroso del material vegetal, como hojas, semillas, y también sus productos, utilizando técnicas y equipos de última generación, es fundamental para conocer las características de los cultivos con los que trabajamos. El servicio de ANÁLISIS DE MATERIAL VEGETAL incluye diversos prestaciones basadas en el análisis mediante diferentes técnicas y con diferentes finalidades. Por ejemplo, estas prestaciones abarcan tanto la caracterización de materia vegetal mediante herramientas de biología molecular, como el uso de equipos para la amplificación de fragmentos de ADN o la caracterización del perfil lipídico de aceites mediante NIRS.

Servicio de análisis de compuestos químicos presentes en productos y subproductos derivados de la oliva. Así como, la determinación de parámetros físico-químicos para el control de las fermentaciones de aceitunas de mesa y su calidad.

La unidad de tecnología y caracterización de lípidos vegetales ofrece servicios especializados en la identificación, cuantificación y caracterización de compuestos lipídicos mediante técnicas avanzadas de cromatografía de gases (GC) y cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Estas metodologías permiten determinar perfiles de ácidos grasos, presencia de compuestos minoritarios y caracterizar la calidad y estabilidad de aceites y grasas. Además, la unidad realiza el análisis de curvas de fusión de aceites y grasas mediante calorimetría diferencial de barrido (DSC), lo que permite evaluar su comportamiento térmico, puntos de fusión y cristalización, esenciales para aplicaciones en la industria alimentaria, cosmética y farmacéutica. Estos servicios son clave para el desarrollo de nuevos productos, control de calidad y estudios de estabilidad en aceites y grasas.