Análisis de compuestos: RMN

Los distintos experimentos que pueden realizarse en el Servicio de RMN del CENQUIOR, dependiendo del equipo y de las sondas disponibles para cada uno, (http://www.cenquior.csic.es/cenquior/rmn/experimentosrealizables), son:
- Experimentos monodimensionales de 1H, 13C, 15N, 29Si, 19F, 31P, 11B.
- Experimentos bidimensionales de correlación homonuclear (COSY, TOCSY), de correlación heteronuclear (HSQC, HMBC) e híbridos (HSQC-TOCSY).
- Experimentos de Efecto Nuclear Overhauser monodimensionales (NOE, ROE) y bidimensionales (NOESY, ROESY).
- Experimentos de difusión (DOSY).
Además, los experimentos pueden ser realizados a diferentes temperaturas, desde -100 a +100 ºC, dependiendo del equipo.
EQUIPOS:
BRUKER AVANCE III-400
Equipo superconductor de 9.395 T, capaz de obtener espectros tanto protónicos como heteronucleares, mono o bidimensionales. Dispone de una sonda de detección con gradientes, así como de una unidad de temperatura variable.
JEOL JNM-ECZ400R
Equipo superconductor de 9.395 T. Dispone de una sonda royal con gradientes, así como de una unidad de temperatura variable.
Equipo superconductor de 9.395 T, capaz de obtener espectros tanto protónicos como heteronucleares, mono o bidimensionales. Dispone de una sonda royal con gradientes, así como de una unidad de temperatura variable.
VARIAN INOVA-300
Equipo superconductor de 7.046 T, capaz de obtener espectros tanto protónicos como heteronucleares, mono o bidimensionales. Dispone de una sonda de detección inversa y una sonda multinuclear de detección directa, así como de una unidad de temperatura variable. Accesible a usuarios internos autorizados.
BRUKER AVANCE-300
Equipo superconductor de 7.046 T, capaz de obtener espectros de protón y carbono-13, mono o bidimensionales. Dispone de una sonda de detección inversa, unidad de temperatura variable y un intercambiador de muestras automático.

Servicio de resonancia magnética nuclear (500 MHz y 400 MHz)
Descripción:
Análisis de compuestos por RMN 1H, 13C, 15N, 19F, 31P, entre otros núcleos
Equipamiento:
Espectrómetros modelos Bruker Avance NEO 500 y Avance 400

Caracterización estructural de moléculas pequeñas: Elucidación de la conectividad, configuración estereoquímica y conformación
Caracterización estructural de macromoléculas
Caracterización estructural de sólidos (Caracterización de la estructura de sólidos no solubles; Caracterización de sustancias inmovilizadas sobre sólidos; Estudio de propiedades de movilidad molecular en sólidos)
Análisis de mezclas, cuantificación e identificación de componentes
Estudio de mecanismos de reacciones químicas, caracterización de intermedios de reacción, obtención de parámetros cinéticos y termodinámicos de las reacciones
Estudio de interacciones moleculares, afinidad host-guest, reconocimiento molecular enzima-sustrato

La espectroscopia de Resonancia Magnética Nuclear (RMN) es una técnica no destructiva, basada en las propiedades magnéticas de la materia y aplicable a cualquier sustancia en estado líquido o sólido que contenga núcleos con valores de spin nuclear distintos de cero (1H, 13C, 15N, 19F, 31P, etc.), pudiendo utilizarse para resolver diversos problemas de la investigación en química, biología, biomedicina y ciencia de materiales, así como de control de calidad de productos de investigación y/o comerciales.
La RMN en medio líquido (disponible en el CIB) comprende un versátil conjunto de técnicas y experimentos aplicables a la elucidación estructural, la determinación conformacional y análisis estereoquímico de moléculas orgánicas e inorgánicas, la caracterización estructural y tridimensional de biomoléculas (proteínas, ácidos nucleicos, carbohidratos, lípidos etc.), el estudio de los procesos de reconocimiento molecular e interacciones entre biomoléculas y moléculas de interés biológico y biomédico, el análisis de equilibrios químicos, el seguimiento de cinéticas de reacciones químicas y bioquímicas y el análisis y cuantificación de mezclas, entre otros. Los ensayos se realizan en solución, en agua u otros disolventes, con la posibilidad de realizar experimentos a diferentes temperaturas cuando la investigación así lo requiere.
EXPERIMENTOS QUE PUEDEN REALIZARSE EN EL SERVICIO DE RMN DEL CIB:
Experimentos monodimensionales de 1H, 13C, 15N, 19F
Experimentos bidimensionales de correlación homonuclear (COSY, TOCSY, etc.), de correlación heteronuclear (HSQC, HMBC, etc.) e híbridos (HSQC-TOCSY, etc.)
Experimentos de Efecto Nuclear Overhauser monodimensionales (NOE, ROE) y bidimensionales (NOESY, ROESY, etc.)
Experimentos de Diferencia de Transferencia de Saturación (STD)
Experimentos de determinación de tamaño molecular por difusión (DOSY)
El rango de temperaturas de trabajo, dependiendo del equipo utilizado, varía entre -10 y 80 ºC.
El servicio de RMN del CIB dispone de tres espectrómetros de RMN de la marca Bruker, dos de 600 MHz y uno de 500 MHz
EQUIPAMIENTO TÉCNICO DEL SERVICIO DE RMN DEL CIB:
Espectrómetros de RMN:
Bruker AV 500MHz
Bruker AV 600MHz, con criosonda
Bruker AV III 600MHz, con cargador de 24 muestras ¿Sample Case Standard, cooled¿
Sondas disponibles:
SEF 500MHz S2 5mm con gradiente en Z (en uso en el AV 500MHz)
TXI 600MHz S3 5mm con gradiente en Z (en uso en el AVIII 600MHz)
CP TXI 600 S3 H-C/N-D-05 Z (en uso en el AV 600MHz)
TXI 500MHz S2 5mm con gradiente en Z
TXI 600MHz S3 5mm con gradiente en Z; BTO
SEF 600MHz S3 5mm con gradiente en Z
Software de adquisición y procesado:
TopSpin 2.1 en los equipos AV 500MHz y AV 600 MHz con criosonda
TopSpin 3.5 pl5 en el equipo AVIII 600 MHz
IconNMR 5.0 en el equipo AVIII 600 MHz

Identificación y semicuantificacion de metabolitos primarios y secundarios mediante experimentos mono-dimensionales 1H-RMN y bidimensionales 2D 1H-13C-HSQC con la adición de patrón externo (TSP-d4 o DSS-d6).

Adquisición de espectros de RMN en el equipo de 400 MHz en modo autoservicio para caracterización estructural de moléculas pequeñas. Uso del equipo con el cambiador automático de 100 muestras.