Electroporación de vectores de targeting en células ES

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Mediante esta actuación se persigue modificar una zona específica del genoma del ratón mediante recombinación homóloga con un vector de DNA que cuenta con brazos de homología específicos para el gen diana. El proceso se realiza en células ES proporcionadas por el Servicio de Transgénesis. Se puede optar indistintamente por células R1 (fondo 129) o células G4 (B6x129). Hay dos modalidades, utilizar como diana en el locus Rosa 26, con una alta eficiencia de recombinación, por lo que en este caso solo se realiza el picado de 48 colonias, o utilizar vectores específicos de otros genes, proporcionados por el solicitante, en cuyo caso y dada la variable capacidad de recombinación, se realiza el picado de aproximadamente 190 colonias. La prestación requiere por parte del solicitante proporcionar el vector. En caso de no hacerlo purificado (30 mcg), se aplicarán los suplementos correspondientes para llegar a la obtención del mismo. Las colonias se replican y congelan a -80ºC durante un periodo máximo de 6 meses y se proporciona al solicitante DNA de cada una para que realice la genotipación e identificación de colonias positivas. En caso de sobrepasar este periodo de tiempo no se garantiza la viabilidad de las colonias. La prestación incluye la re-expansión y congelación de un máximo de 10 colonias positivas en nitrógeno líquido