Análisis de compuestos: GC-MS

El objetivo del Servicio de Instrumentación Científica (SIC) es proporcionar la infraestructura científica necesaria para los investigadores de la EEZ, ofreciéndoles soporte instrumental a la investigación científica y técnica, y asesoramiento sobre técnicas experimentales. Sus actividades principales son el análisis de muestras, la obtención de resultados analíticos, la interpretación de los mismos, y el asesoramiento científico-técnico. Este Servicio forma parte de la Red de Servicios Científico-Técnicos del CSIC.

El Servicio de cromatografía líquida (HPLC) y de gases (GC) del IBVF, es un servicio analítico desarrollado para la identificación de diversos tipos de metabolitos y su cuantificación. El Servicio cuenta con dos equipos de HPLC y dos equipos de GC. Actualmente el Servicio de Cromatografía desarrolla las siguientes aplicaciones: GC Esteres metílicos de Ácidos Grasos (FAMES) Etileno (Actividad Nitrogenasa) HPLC Aminoácidos (mediante derivatización con PICT realizada por el técnico) Ácidos orgánicos Etanol Carotenoides Nitratos Tioles Azúcares (monosacáridos, disacáridos) ADP-Glucosa Cianuros

Para una información completa consultar: http://www.ictan.csic.es/servicios/servicios-analiticos/ En la pagina web se describen tecnicas, equipos, tarifas y modo de acceso al Servicio. La Unidad se desglosa en 9 diferentes laboratorios tematicos: - Laboratorio de Espectrometría de masas - Laboratorio de Cromatografía General - Laboratorio de Análisis Elemental (metales y no metales) - Laboratorio de Caracterización y propiedades físicas (Textura; Ppdes térmicas) - Laboratorio de Instrumentación preparativa - Laboratorio de Espectroscopía - Laboratorio de Microbiología - Laboratorio de cultivos celulares - Calibración y Verificación de instrumentación analítica

Análisis cromatográficos de leche, productos lácteos, muestras biológicas y cultivos microbianos Equipación más importante: ACQUITY UPLC H-Class de Waters • Detector UV-visible (PDA), fluorescencia (FLR) y de dispersión de luz evaporativo (ELS) de Waters. HPLC Waters 2695. • Detector de índice de refracción RID 2414, de fotodiodos PDA 996 de Waters y de dispersión de láser multi-ángulo MALS Dawn Heleos-II de Wyatt HPLC Waters 2795 • Detector de fotodiodos PDA 2996 y de fluorescencia SFD 474 de Waters. CG Agilent GC 6890N • Detector de ionización de llama FID, espectrometría de masas 5975B inert MSD CG Agilent GC 8890N • Detector de espectrometría de masas 5977BMSD UPLC Agilent 1290 • Detector de espectrometría de masas LC-IM-QTOF 6560 Ion Mobility

• Análisis de isótopos estables de C, H, O, S y N por combustión/pirolisis (C/TC) en muestra sólida o líquida. • Análisis de isótopos estables de C, H, O y N en compuestos específicos aislados cromatográficamente (CSIA: mediante inyección convencional (GC-(FID)-C/TC-IRMS) o directamente desde muestra sólida por pirólisis (Py-GC-(FID)-C/TC-IRMS) Además el servicio ofrece: • Micro análisis elemental (C, H, O, S, N) en muestra sólida o líquida • Extracción sólido-líquido de suelos, sedimentos, rocas y petróleos en roca (Soxhlet convencional, micro y automático, ultrasonidos y extracción acelerada) • Análisis espectroscópico convencional (FT-IR, UV-Vis) • Cromatografía de gases – Espectrometría de masas (GC/MS* convencional o desde muestra sólida (insoluble) por pirólisis Py-GC/MS*), “fingerprint” de biomarcadores *) Puede realizarse directamente sobre la muestra bruta o en fracciones separadas por procedimentos físicos o químicos.

El Servicio de Cromatografía y Espectroscopia es una unidad multidisciplinar que dispone de un completo equipamiento cromatográfico, tanto para muestras volátiles (cromatografía de gases CG) como para muestras no volátiles (cromatografía de líquidos HPLC) así como de espectroscopia UV/Vis/NIR, FTIR, Raman, CD y VCD. El equipamiento disponible permite realizar determinación cualitativa y cuantitativa, así como estudios de quiralidad, de gran variedad de compuestos así como la caracterización de una gran diversidad de sustancias y materiales. El Servicio está dirigido tanto hacia sectores de investigación básica (academica o centros de investigación) como hacia la industria farmaceutica e industria química general (polímeros, pinturas, cerámicas, cosmética, aromas, petroquímica, etc.) e incluso sectores de la industria alimentaria, química forense o arqueología.

Análisis de aditivos orgánicos y monómeros en materiales polímeros. Estudio de la capacidad antioxidante de materiales mediante ensayos de tiempo de inducción a la oxidación.

El Laboratorio de Dioxinas del IDAEA-CSIC desarrolla su actividad en el estudio de las policlorodibenzo-p-dioxinas (PCDDs) y los policlorodibenzofuranos (PCDFs) en matrices ambientales y alimentos destinados tanto al consumo humano como animal, así como en fluidos y tejidos biológicos (sangre, suero, placenta y tejido adiposo). La técnica analítica empleada es la cromatografía de gases de alta resolución acoplada a la espectrometría de masas de alta resolución (HRGC-HRMS) y cuantificación por el método de dilución isotópica. Además, se incluye el análisis de bifenilos policlorados (PCBs), tanto los catalogados como ‘similares a dioxinas’ (dioxina-like PCBs) como los ‘indicadores’ (marker PCBs). Otras sustancias de interés que pueden ser analizadas en el Laboratorio de Dioxinas incluye a algunos bifenil éteres polibromados (PBDEs). El laboratorio está acreditado por ENAC por la norma UNE-EN ISO/IEC 17025, con número de expediente 159/LE1177.

Servicio de Espectrometría de Masas del Instituto de la Grasa comprende equipos de cromatografía de gases y líquidos acoplados a diferentes analizadores de masas e interfases, incluyendo espectrometría de masas de alta resolución, para análisis cualitativo y cuantitativo. Las determinaciones que se realizan son: - Análisis de compuestos puros o mezclas solubles en solventes orgánicos por GC-MS o GC-HRMS en modo EI, full scan y/o MS-MS. - Determinación de 24 o 57 Componentes Alergénicos en productos de cuidado personal. - Análisis de compuestos puros no volátiles, solubles en agua o mezclas con solventes orgánicos mediante inyección directa o acoplada a HPLC con ionización electrospray (ESI) y/o APcI (pos, neg). - Masa exacta y composición elemental (HPLC-MS y GC-MS).

Tanto la cromatografía de gases (GC) como la cromatografía de líquidos (HPLC) son técnicas analíticas adecuadas para la separación, identificación y cuantificación de carbohidratos de bajo peso molecular. Su acoplamiento a la espectrometría de masas (MS) permite obtener una mayor información estructural de los compuestos objeto de estudio. El servicio dispone de la siguiente instrumentación analítica: - Sistema GC-FID: Cromatógrafo de gases 7980A (Agilent) con detector de ionización de llama. - Sistema GC-MS: Cromatógrafo de gases (Agilent 6890A) acoplado a un espectrómetro de masas con analizador de cuadrupolo (Agilent 5973). - Sistema HPLC-MS: Cromatógrafo de líquidos (1260 INFINITY II, Agilent Technologies) acoplado a un espectrómetro de masas con ionización por electroespray (ESI) y analizador de cuadrupolo (G6125B, Agilent Technologies).

El equipo de investigación responsable del servicio posee amplia experiencia en la determinación de COP y otros contaminantes organohalogenados relacionados en muestras medioambientales, matrices biológicas y artículos de consumo. Para ello se emplean diferentes métodos de tratamiento de la muestra, en función de su naturaleza, y el análisis instrumental por cromatografía de gases (GC) acoplada a espectrometría de masas (MS) en en modo alta resolución (HRMS), mediante el empleo de un analizador de sector magnético, o baja resolución (LRMS) mediante el empleo de analizadores cuadrupolares sencillos (qMS). Los instrumentos disponibles son: • GC-HRMS: Cromatógrafo Trace GC (Thermo Fisher Sc) acoplado al espectrómetro de sector magnético de alta resolución DFS™ (Thermo Fisher Sc) con fuente de impacto electrónico. • GC-LRMS: Cromatógrafo Agilent 7890A acoplado al espectrómetro con analizador cuadrupolar Agilent 5975C, con una fuente de impacto electrónico.

El Servicio proporciona soluciones analíticas, tanto para el sector público como privado, basadas en el análisis por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas (GC-MS) de compuestos volátiles en matrices de diversa naturaleza (alimentos, plantas, suelos, etc). Para el aislamiento/preconcentración de compuestos volátiles previo al análisis cromatográfico se empleará, en función de la aplicación y objetivo del análisis, la microextracción en fase sólida (SPME) o la desorción térmica directa (DTD). El Servicio dispone de la siguiente instrumentación analítica: - GC-MS: Cromatógrafo de gases mod. 8890 acoplado a un espectrómetro de masas con analizador de cuadrupolo mod. 5977C (ambos de Agilent Technologies). - SPME: holder y fibras de distinta naturaleza (Supelco). - Inyector OPTIC 2 (ATAS).

El servicio de análisis y determinación estructural incluye diversas técnicas utilizadas para determinar la composición elemental y la estructura molecular de sustancias químicas puras o de mezclas de las mismas. Adicionalmente se podrán cuantificar las sustancias en mezclas simples o complejas. El servicio dispone de equipos de: 1.- Análisis elemental 2.- Infrarrojo 3.- UV-visible 4.- Polarímetro para determinación de actividad óptica 5.- Espectrometría de masas 6.- Espectroscopía de resonancia magnética nuclear 7.- UV-Con esfera integradora 8.- Servicio de cálculo científico 9.- Sistema de purificación de disolvente (SPS)

Parámetros determinados de control físico-químicos: color, sólidos en suspensión, conductividad, medidas de radiactividad e isotópicas, pH, materia orgánica, aniones y cationes mayoritarios y minoritarios ej.: cloruro, fluoruro, sulfato, sulfuro, nitrato, nitrito, calcio, magnesio, sodio, potasio etc. Contaminantes: fenoles, cianuro, metales, hidrocarburos, pesticidas, compuestos volátiles etc. Técnicas disponibles: gravimétricas, volumétricas, espectroscópicas de absorción y de emisión atómica (elementos mayoritarios y trazas), espectroscópicas de absorción molecular en flujo continuo (iones mayoritarios en agua), espectrofotometría IR (TOC), electrometría (pH, fluoruros, cianuros, conductividad), cromatografía GC/MS (VOC, plaguicidas, PAH’s), cromatografía iónica (aniones a nivel de trazas: bromuro, bromato, nitrito, nitrato, sulfato, fluoruro, cloruros y fosfato). Ver Acreditación. ENAC 62/LE-169

La determinación de hidrocarburos de tipo aceite mineral tanto saturados (MOSH) como aromáticos (MOAH) se realiza según el método ISO 20122 utilizando un robot automatizado de preparación de muestras junto con un cromatógrafo líquido de alta presión acoplado a un cromatógrafo de gases con detector de ionización de llama. La determinación se realiza en los rangos de átomos de carbono recogido en la guía publicada por el JRC de la unión Europea. Según dicho método, el LOQ calculado para MOSH es de 3 mg/kg y para MOAH es de 2 mg/kg. La determinación de monocloropropanoles (3-MCPD) y glicidol se realiza mediante un robot automatizado de preparación de muestras acoplado a un cromatógrafo de gases con detector de espectrometría de masas. El LOQ para ambas determinaciones es 0,2 mg/kg.

Análisis de metabolitos secundarios botánicos/fúngicos, volátiles y no volátiles