Citometría de Flujo para muestras Marinas: Recuento de pico- y nanoalgas

El servicio dispone de cuatro citómetros de flujo: un BD FACSCalibur, conectado a un ordenador Mac, equipado con un láser azul (488 nm) y un láser rojo (635 nm) y fotomultiplicadores que colectan la señal lumínica dispersada y absorbida para enviar los datos al ordenador. Puede separar células. Un citómetro Partec C6, con un láser azul (488 nm) y uno violeta (405 nm). Un citómetro BD Accuri C6 Plus, con lásers rojo (640 nm) y azul (488 nm). Y un citómetro Beckman Coulter CytoFLEX-S, con lásers azul (488 nm), rojo (638 nm), violeta (405 nm) y amarillo (561 nm). El laboratorio dispone también de campana extractora, congelador de -80ºC para almacenar muestras, frigorífico donde se almacenan los reactivos y tinciones necesarios, baño termostático, sonicador, vórtex, balanza y acceso a sistema MilliQ.

El servicio de citometría de flujo dispone de un citómetro de flujo FACSCalibur (FCS) y de todo el equipo asociado necesario (sistema MilliQ, balanza, vórtex, etc.) para detectar y enumerar bacterias y pequeños protistas fototróficos en ambientes marinos. El FCS es utilizado por los científicos IIM, pero está disponible para otros investigadores, organizaciones y empresas sobre una base de coste por uso.

El Servicio de Citometría Marina del Centro Oceanográfico de Canarias proporciona acceso al citómetro de flujo Beckman Cytoflex equipado con tres láseres (violeta, azul y amarillo) a distintos grupos de investigación internos y usuarios externos de universidades, centros de investigación y organismos oficiales. El laboratorio cuentan con una infraestructura básica de apoyo, incluyendo centrífuga, congeladores, estufas, campanas extractoras, cabina de flujo laminar, baños termostáticos, sonicador, balanzas de precisión y armarios de seguridad.

La citometría de flujo es imprescindible para la investigación marina, empleándose principalmente para la determinación de la abundancia y biomasa de femto-, pico- y nanoplancton (<1-5µm), así como para determinar el estado fisiológico de las células, estructuras y componentes específicos celulares mediante sondas moleculares específicas. Se ofrecen análisis de muestras de plancton (procariotas, cianobacterias, pico y nano algas) utilizando un citómetro Beckman Coulter Cytoflex‑S (referencia de la infraestructura Plan Nacional, EQC2019-006636-P ). Está equipado con 4 láseres, near UV (375nm), azul (488nm), rojo (638nm), violeta (405nm) Se dispone además de Campana para fijar y procesar muestras, congelador de ‑80ºC para almacenamiento de las muestras, y un contrato de mantenimiento con Air‑Liquide para el suministro de nitrógeno liquido.

El Servicio de Citometría de Flujo para Muestras Marinas del Instituto Mediterráneo de Estudios Avanzados (IMEDEA) está equipado con un clasificador celular espectral Bigfoot (Thermo Fisher Scientific). Gestionado mediante el software Sasquatch (SQS) y optimizado para el análisis y la separación de microorganismos marinos. Esta técnica permite caracterizar de forma simultánea y multiparamétrica las propiedades físicas y ópticas de miles de partículas individuales en suspensión, tales como bacterias o fitoplancton. La metodología analítica se fundamenta en la detección de la emisión de fluorescencia (natural o inducida por fluorocromos) y en la dispersión de la luz. Para ello, el equipo cuenta con 5 láseres —UV (349 nm), violeta (405 nm), azul (488 nm), amarillo-verde (561 nm) y rojo (640 nm)—, así como con 48 detectores de fluorescencia y 5 de dispersión (SSC/FSC estándar, FSC/SSC polarizado y un detector de pequeñas partículas, FSC a 405 nm).