- Áreas de investigación
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- Biología y Biomedicina
- Grupo
-
- Muestreo, Preparación, Tratamiento y Conservación de Muestras
- Subgroup
-
- Experimentación Animal
Electroporación de vectores de targeting en células ES
| Support unit | Support unit Information | Selected service | Other services |
|---|---|---|---|
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TRANSGENESIS Y EDICIÓN GENÉTICA CNB - Madrid |
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CBM - Madrid |
Service general data
- Support unit: TRANSGENESIS Y EDICIÓN GENÉTICA
- Institute: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGIA
- Locality: Madrid (Madrid)
- Service's web: http://www.cnb.csic.es/index.php/en/servicios/108-transgenesis.html
El servicio de transgenesis es una unidad compartida entre el CNB y CBMSO e integrada en el Campus Internacional de Excelencia UAM+CSIC. Su mision es apoyar a los grupos de investigación en la creación establecimiento o intercambio de estirpes de raton genéticamente alteradas. La unidad ofrece asesoramiento cientifico y técnico para la obtención del modelo de raton mas adecuado, bien por transgénesis aditiva o mutagénesis dirigida (modelos KO, KI o condicionales) con células ES o mediante edicion genetica (CRISPR). La unidad también realiza rederivaciones sanitarias para incorporar lineas procedentes de intercambios cuyo estado sanitario impide la entrada directa, genotipaciones bajo demanda, edicion genetica de lineas celulares y obtencion de embriones y líneas ES. Se cuenta con un laboratorio de microinyección y electroporacion, laboratorio de cultivo de células ES y laboratorio de biologia molecular, asi como espacio asignado en los animalarios de ambos centros CNB y CBMSO.
Electroporación de vectores de targeting en células ES
Benefit description
Mediante esta actuación se persigue modificar una zona específica del genoma del ratón mediante recombinación homóloga con un vector de DNA que cuenta con brazos de homología específicos para el gen diana. El proceso se realiza en células ES proporcionadas por el Servicio de Transgénesis. Se puede optar indistintamente por células R1 (fondo 129) o células G4 (B6x129). Hay dos modalidades, utilizar como diana en el locus Rosa 26, con una alta eficiencia de recombinación, por lo que en este caso solo se realiza el picado de 48 colonias, o utilizar vectores específicos de otros genes, proporcionados por el solicitante, en cuyo caso y dada la variable capacidad de recombinación, se realiza el picado de aproximadamente 190 colonias. La prestación requiere por parte del solicitante proporcionar el vector. En caso de no hacerlo purificado (30 mcg), se aplicarán los suplementos correspondientes para llegar a la obtención del mismo. Las colonias se replican y congelan a -80ºC durante un periodo máximo de 6 meses y se proporciona al solicitante DNA de cada una para que realice la genotipación e identificación de colonias positivas. En caso de sobrepasar este periodo de tiempo no se garantiza la viabilidad de las colonias. La prestación incluye la re-expansión y congelación de un máximo de 10 colonias positivas en nitrógeno líquido| Options | Unit | Public Sector | Other customers |
|---|---|---|---|
| Electroporacion en locus Rosa 26 o similar | electroporacion | 1012.28 € | 1108.68 € |
| Suplemento manip vector-Miniprep | unidad | 2.8 € | 3.07 € |
| suplemento placa adicional (hasta 48 clones) | €/ placa | 1012.28 € | 1108.68 € |
| suplemento manip vector- transformacion | unidad | 17.43 € | 19.09 € |
| Suplemento manip vector-Maxiprep | unidad | 64.27 € | 70.39 € |
| Suplemento manip vector-amplificacion colonias | €/lote 10 muestras | 27.47 € | 30.08 € |
| Electroporación general | electroporacion | 2260.49 € | 2475.77 € |
Other services
- Amplificación por PCR
- Asesoramiento y formación
- Preparación, purificación o cuantificación de muestras de DNA y RNA
- Cultivo celular
- Obtención de embriones de ratón en fases de preimplantación
- Transferencia de embriones de ratón
- Fecundación in vitro
- Microinyección de células ES
- Animales de experimentación: Producción
- Animales de experimentación: Manipulación
- Rederivación aséptica por transferencia de embriones.
- Transgenesis: Microinyección de embriones de ratón
Service general data
- Support unit: EDICIÓN GENÉTICA DE RATÓN
- Institute: CENTRO DE BIOLOGIA MOLECULAR SEVERO OCHOA
- Locality: Madrid (Madrid)
- Service's web: http://www.cbm.csic.es
El servicio de edición genética de ratón es una unidad compartida entre el CNB y CBMSO e integrada en el Campus Internacional de Excelencia UAM+CSIC. Su misión es apoyar a los grupos de investigación en la creación de líneas de ratón genéticamente alteradas. La unidad ofrece asesoramiento científico y técnico para la obtención del modelo de ratón más adecuado, bien por transgénesis aditiva o mutagénesis dirigida (modelos KO, KI o condicionales) con células ES o mediante edición genética (CRISPR). La unidad también da apoyo al animalario del CBM en rederivaciones sanitarias para incorporar lineas procedentes de intercambios cuyo estado sanitario impide la entrada directa, genotipaciones bajo demanda, edición genética de líneas celulares y obtención de embriones y líneas ES. Se cuenta con un laboratorio de microinyección y electroporacion, laboratorio de cultivo de células ES y laboratorio de biología molecular, así como espacio asignado en los animalarios de ambos centros CNB y CBM
Electroporación de vectores de targeting en células ES
Benefit description
Mediante esta actuación se persigue modificar una zona específica del genoma del ratón mediante recombinación homóloga con un vector de DNA que cuenta con brazos de homología específicos para el gen diana. El proceso se realiza en células ES proporcionadas por el Servicio de Transgénesis. Se puede optar indistintamente por células R1 (fondo 129) o células G4 (B6x129). Hay dos modalidades, utilizar como diana en el locus Rosa 26, con una alta eficiencia de recombinación, por lo que en este caso solo se realiza el picado de 48 colonias, o utilizar vectores específicos de otros genes, proporcionados por el solicitante, en cuyo caso y dada la variable capacidad de recombinación, se realiza el picado de aproximadamente 190 colonias. La prestación requiere por parte del solicitante proporcionar el vector. En caso de no hacerlo purificado (30 mcg), se aplicarán los suplementos correspondientes para llegar a la obtención del mismo. Las colonias se replican y congelan a -80ºC durante un periodo máximo de 6 meses y se proporciona al solicitante DNA de cada una para que realice la genotipación e identificación de colonias positivas. En caso de sobrepasar este periodo de tiempo no se garantiza la viabilidad de las colonias. La prestación incluye la re-expansión y congelación de un máximo de 10 colonias positivas en nitrógeno líquido| Options | Unit | Public Sector | Other customers |
|---|---|---|---|
| Suplemento manip vector-Maxiprep | unidad | 64.27 € | 70.39 € |
| Suplemento manip vector-amplificacion colonias | €/lote 10 muestras | 27.47 € | 30.08 € |
| Electroporación general (180-200 clones) | electroporacion | 2260.49 € | 2475.77 € |
| suplemento placa adicional (hasta 48 clones) | €/ placa | 1012.28 € | 1108.68 € |
| Suplemento manip vector-Miniprep | unidad | 2.8 € | 3.07 € |
| Electroporacion en Rosa 26 o similar | electroporacion | 1012.28 € | 1108.68 € |
| suplemento manip vector- transformacion | unidad | 17.43 € | 19.09 € |
Other services
- Amplificación por PCR
- Asesoramiento y formación
- Preparación, purificación o cuantificación de muestras de DNA y RNA
- Cultivo celular
- Obtención de embriones de ratón en fases de preimplantación
- Transferencia de embriones de ratón
- Fecundación in vitro
- Microinyección de células ES
- Animales de experimentación: Producción
- Animales de experimentación: Manipulación
- Transgenesis: Microinyección de embriones de ratón