- Áreas de investigación
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- Biología y Biomedicina
- Grupo
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- Microscopía, Microanálisis e Imagen
- Subgroup
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- Transmisión
Corte de muestras por ultramicrotomo para TEM
| Support unit | Support unit Information | Selected service | Other services |
|---|---|---|---|
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CNB - Madrid |
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SERVICIO DE MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA CBM - Madrid |
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CINN - San Martín del Rey Aurelio |
Service general data
- Support unit: MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
- Institute: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGIA
- Locality: Madrid (Madrid)
- Service's web: http://www.cnb.csic.es/
El Servicio de Microscopía electrónica del CNB dispone de las técnicas y de los equipos específicos para el estudio de muestras biológicas por microscopía electrónica de transmisión. El tipo de muestras que se pueden procesar son de naturaleza muy variada (agregados macromoleculares, fragmentos celulares, virus, bacterias, protozoos, células y tejidos animales y vegetales…) pudiéndose obtener información sobre la morfología, tamaño, estructura, subestructura a nivel celular y tisular, así como la localización de macromoléculas a nivel subcelular. El objetivo de este servicio es prestar apoyo científico-técnico tanto a los investigadores del CNB, como a los del sector público o privado, poniendo a su disposición los equipos necesarios, asesorando sobre las técnicas más adecuadas, y ofreciendo la preparación especializada de muestras, realización de la microscopía, toma de datos y apoyo para la interpretación de los mismos.
Corte de muestras por ultramicrotomo para TEM
Benefit description
La preparación de las muestras para microscopía electrónica de transmisión incluye diferentes pasos: fijación primaria, fijación secundaria, deshidratación, infiltración en resina y polimerización. La fijación puede realizarse mediante tratamiento químico o bien mediante el uso de criógenos. La deshidratación es el proceso de reemplazar el agua de las células por un fluido que actúa como solvente entre el ambiente acuoso de la célula y los medios de inclusión hidrófobos. La infiltración es el proceso mediante el cual los deshidratantes o los fluidos de transición se reemplazan gradualmente con resina. Finalmente, las muestras en resina pura se transfieren a moldes o cápsulas y se polimerizan para formar un sólido. Estos procesos pueden llevarse a cabo a temperatura ambiente o baja temperatura. Los especímenes embebidos en resina se pueden seccionar para obtener el tamaño apropiado para microscopía electrónica de transmisión. Estas técnicas permiten la observación de muestras biológicas por microscopía electrónica, así como la realización de estudios ultraestructurales y citoquímicos. Este protocolo es útil para tejidos animales, tejidos vegetales, bacterias, cultivos celulares, etc.| Options | Unit | Public Sector | Other customers |
|---|---|---|---|
| Cortes en ultramicrotomo para TEM. Cortes semifinos (porta) | €/portaobjetos | 66.59 € | 72.93 € |
| Uso ultramicrotomo UC6 (hora) | €/h | 48.14 € | 52.72 € |
| Cortes en ultramicrotomo para TEM. Cortes ultrafinos-tejidos | €/bloque | 115.19 € | 126.16 € |
| Cortes en ultramicrotomo para TEM. Criocortes (sesión) | €/sesión | 168.66 € | 184.72 € |
| Uso ultramicrotomo Ultracut (hora) | €/h | 45.69 € | 50.04 € |
| Cortes en ultramicrotomo para TEM.Cortes ultrafinos (bloque) | €/bloque | 88.51 € | 96.94 € |
Service general data
- Support unit: SERVICIO DE MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
- Institute: CENTRO DE BIOLOGIA MOLECULAR SEVERO OCHOA
- Locality: Madrid (Madrid)
- Service's web: http://web4.cbm.uam.es/joomla-rl/index.php/es/servicios/servicios-cientificos/microscopia-electronica
El Servicio de Microscopía Electrónica del CBM (SME-CBM) ofrece apoyo científico-técnico en microscopía electrónica de transmisión en el campo de la biología. El SME-CBM está preparado para proporcionar un servicio integral en la realización de los trabajos, que incluye la asistencia a los usuarios en la elección de métodos y protocolos adecuados a su proyecto, el procesamiento de las muestras, la observación al microscopio electrónico y el análisis, interpretación y documentación de los resultados. Las técnicas ofertadas incluyen el procesamiento de material biológico tanto convencional como a baja temperatura, la ultramicrotomía, la crioultramicrotomía, técnicas de criofractura y "freeze-etching", la inmunomicroscopia con complejos de oro coloidal, la microscopía correlativa óptico-electrónica y la microscopía de ácidos nucleicos. Disponemos de dos microscopios electrónicos de transmisión, de 100kV y 120kV, y del equipamiento necesario para el procesamiento de muestras.
Corte de muestras por ultramicrotomo para TEM
Benefit description
El poder de penetración de los electrones generados en un microscopio de 100 kV ó 120kV se limita a unos 100- 150 nm para el material biológico, por lo que para tener una imagen de transmisión hay que obtener cortes por debajo de este grosor cuando trabajamos con la mayoría de las muestras biológicas: células o tejidos. En el caso de muestras pequeñas, particuladas, como complejos de proteínas, virus,vesículas o fracciones subcelulares podemos observarlas en el TEM sin necesidad de obtener cortes. La ultramicrotomía es un procedimiento que permite obtener secciones muy finas de material embebido en una resina lo suficientemente dura. La obtención de secciones implica el tallado del bloque y la obtención de cortes semifinos (1 micrometro) para localizar en el microscopio óptico la zona de interés y la posterior obtención de los cortes ultrafinos con una cuchilla de diamante. Los cortes se recogen sobre rejillas de microscopía electrónica. Para proporcionar mayor contraste a los electrones los cortes montados en las rejillas se tiñen con Acetato de Uranilo y Citrato de Plomo . Una alternativa a la inclusión en resina es la congelación de las células o tejidos, debidamente fijados y crioprotegidos, y la obtención de criosecciones en un crioultramicrotomo. En estos cortes las células permanecen hidratadas y se protegen con una película de metilcelulosa para ser observados en el TEM.| Options | Unit | Public Sector | Other customers |
|---|---|---|---|
| Cortes ultrafinos | Bloque | 39.98 € | 46.6 € |
| Cortes semifinos | Porta | 17 € | 21.3 € |
| Criocortes | Sesión | 178.89 € | 231.71 € |
Other services
- Fijación química de muestras biológicas
- Inmunoensayo
- Tratamiento muestra: Inclusión
- Tratamiento de muestras: metalizado por evaporación
- Observación/fotografía de muestras biológicas por TEM
- Suministro de reactivos generales y soportes para microscopía
- Microscopía electrónica: Tinción negativa
- Criofijación de muestras biológicas.
- Microscopía electrónica: Sombreado de carbon.
Service general data
- Support unit: Microscopía electrónica
- Institute: CENTRO DE INVESTIGACION EN NANOMATERIALES Y NANOTECNOLOGIA
- Locality: San Martín del Rey Aurelio (Asturias)
- Service's web: http://www.cinn.es
El servicio dispone de: . microscopio electrónico de transmisión JEOL 1011 con una cámara CCD. . sistema de congelación de muestras a alta presión (Leica EM ICE). . sistema de criosustitución automático (Leica EM AFS2). . ultramicrotomo (Leica UC Enuity).
Corte de muestras por ultramicrotomo para TEM
Benefit description
Se ofrece: . obtención de cortes semifinos y ultrafinos.| Options | Unit | Public Sector | Other customers |
|---|---|---|---|
| Cortes en ultramicrotomo para TEM. Cortes ultrafinos | muestra | 58.64 € | 64.23 € |
| Cortes en ultramicrotomo para TEM. Cortes semifinos. | Porta | 32.06 € | 35.12 € |