Purification of recombinant proteins

La Plataforma de Proteómica y Bioquímica Dorothy Hodgkin (https://www.cabd.es/es/pages/85/plataforma-de-proteomica-y-bioquimica-dorothy-hodgkin.html) realiza diversos trabajos y estudios con proteínas desde una perspectiva multidisciplinar. Los servicios ofrecidos abarcan desde el análisis de proteomas hasta la purificación de proteínas a la carta, pasando por la caracterización de interacciones intermoleculares o la detección y cuantificación de proteínas en muestras biológicas. Este servicio ofrece asistencia técnica y entrenamiento en experimentos de Proteómica o Bioquímica incluyendo preparación de muestras, electroforesis de proteínas, purificación de proteínas o análisis de interacciones proteína/proteína.

El Laboratorio posee instrumentación y emplea técnicas adecuadas para la preparación de muestras biológicas para su análisis estructural. Especialmente se poseen los medios instrumentales y se cuenta con experiencia en la expresión, producción y purificación de proteínas y dominios de proteínas etiquetados para su análisis por espectroscopía de RMN. Los servicios que ofrece el laboratorio son: Amplificación de fragmentos génicos por PCR, clonaje de genes en vectores de expresión; producción de proteínas sin etiquetar o etiquetadas en isótopos estales (13C, 15N y 2H) en sistemas biológicos heterólogos, especialmente E. coli y P. pastoris; preparación de muestras para su análisis por RMN El equipamiento del que se dispone es: Termociclador, Incubadores orbitales, fermentador de pequeño volumen, sonicador, centrífugas, equipo de cromatografía tipo FPLC, sistemas de electroforesis, espectrofotómetro “nanodrop”, balanzas, pHmetros, liofilizador, concentrador “speed-vac

Esta compuesto por la prestación de Desarrollo de producción de vacunas y por el de Citometría de flujo, cada una con varias variantes específicas. Desarrollo y Producción de Vacunas: Purificación de proteínas recombinantes: las mismas están unidas a diferentes tags mediante cromatografía líquida de la proteína rápida (FPLC) caracterización mediante electroforesis y western blot. Posibilidad de hacer refolding y cuantificación. Producción de proteínas recombinantes: realizadas en diferentes sistemas de expresión según las necesidades. Incluye amplificación del gen codificante, clonación en diferentes vectores y expresión en los diferentes cultivos. No incluye purificación (servicio aparte). Formulación de vacunas: se realiza con diferentes adyuvantes listos para inmunización de gran variedad de animales

El servicio cuenta con un laboratorio con el equipamiento necesario para la preparación, purificación y caracterización de biomoléculas, tales como proteínas de membrana u otros sistemas, que sean sensibles a la luz y necesiten condiciones de oscuridad para su manipulación y estudio. El equipamiento incluye, además de los instrumentos básicos para purificación y caracterización (sistema de cromatografía tipo FPLC, determinación de tamaño de partícula), una variedad de fuentes de iluminación (LED, diodos láser) para irradiar las muestras fotosensibles con distintas longitudes de onda. Todas las operaciones se llevan a cabo bajo un control estricto de electricidad estática con kits apropiados de protección, lo que garantiza la integridad tanto de los dispositivos de irradiación como de las muestras.