Desalting and concentration by Zip-Tip

Descripción del servicio

Desalado de los péptidos obtenidos tras la digestión enzimática de proteomas empleando resina C18: Zip-tip (Millipore), OMIX Pipette tips (Agilent Technologies). ZipTip es una punta de pipeta de 10 uL (P-10) con un lecho cromatográfico fijo en su extremo, de modo que no hay volumen muerto. Se emplea para purificar y concentrar femtomoles a picomoles de péptidos antes del análisis, proporcionando una mejor calidad de los datos obtenidos. La muestra se aspira y se dispensa a través de ZipTip para unir, lavar y eluir. Las péptidos se obtienen libres de contaminantes y se eluyen en 0.5-4 uL para su análisis mediante espectrometría de masas. La punta de OMIX se acondiciona con soluciones humectantes y equilibradoras para asegurar una unión óptima. Durante la aplicación de la muestra, los péptidos y las proteínas tienen una fuerte afinidad por Bond Elut OMIX ya que es una superficie de sílice monolítica hidrofóbica. Sales, detergentes y otros contaminantes hidrófilos, presentes en las digestiones proteolíticos, pasan a través de la punta sin ser retenidos. Los contaminantes residuales, que están unidos débilmente al material absorbente Bond Elut OMIX, se lavan con un enjuague de agua ligeramente ácida. Los péptidos diana son recuperados concentrados y purificados empleando un disolvente acuoso-orgánico ácido.