Nuevas nucleasas Cas9 con características únicas para edición genética CRISPR-Cas

Nuevas nucleasas Cas9 de origen marino para edición genética mediante el sistema CRISPR-Cas cuyas aplicaciones van desde la terapia génica, a la mejora de organismos vegetales y animales.

Necesidad del Mercado: Los sistemas CRISPR-Cas son ampliamente utilizados en ingeniería genética para editar el ADN y modificarlo de forma precisa. Actualmente se utilizan para terapia génica, y en biotecnología y agricultura para mejorar y modificar organismos concretos con características deseadas.
Sin embargo, las actuales Cas9 muestran algunos inconvenientes como la falta de precisión (off-targets), riesgo de inmunogenicidad o un gran tamaño, lo que dificulta su introducción en ciertas células.
Por todo ello, existe una necesidad de caracterizar y desarrollar nuevas moléculas Cas9 que puedan mejorar la versatilidad y eficiencia de los sistemas CRISPR-Cas.

Solución propuesta: Se han identificado y caracterizado dos nuevas nucleasas Cas9 (DO1 y DO2) , las cuales muestran una baja similitud con cualquier otra Cas9 funcional descrita. Asimismo, presentan secuencias tracrRNA y crRNA únicas. Estas nuevas Cas9 presentan propiedades biofísicas únicas debido a su origen microbiano marino y de hábitat profundo.
Se han realizado pruebas de concepto en el organismo C. elegans y se están realizando nuevas pruebas en otros tipos celulares. Además se han testeado en organismos vegetales, mostrando mayor eficiencia que las actuales Cas9.

Ventajas competitivas

DO1 tiene un tamaño mas pequeño que las actuales Cas9.
Disponen de una alta especificidad lo que disminuye la posibilidad de off-targets.
Son termosensibles (se desnaturalizan a t>30ºC).
DO2 edita la misma secuencia que SpCas9 (tratar casos de inmunogenicidad).
DO1 tiene actividad catalítica a baja temperatura (estructura proteica flexible).