PIF2025 - Papel de los piRNAs en la regulación de la oogénesis de insectos - (PID2024-155461OB-I00)

Los piRNAs son RNAs no codificantes de 26-31 nt cuya biogénesis y actividad están vinculadas a las proteínas Piwi y AGO3. Su principal función es el silenciamiento de transposones, pero recientemente se ha comprobado que también pueden regular la expresión de mRNAs convencionales. En un proyecto anterior describimos más de 300.000 piRNAs en los ovarios de la cucaracha Blattella germanica y su expresión en diferentes estadios de la oogénesis. El presente proyecto pretende estudiar los piRNAs que regulan diferentes mRNAs diana durante la oogénesis. La hipótesis es que los piRNAs son clave en la oogénesis de insectos regulando los niveles de mRNAs. Objetivos: -Identificación y cuantificación de los mRNAs ováricos en los mismos estadios de la oogénesis para los que se dispone de niveles de piRNAs y comparación de los perfiles. -Inmunoprecipitación de Piwi y AGO3 para la identificación de los piRNAs y mRNAs con los que interaccionan. -Predicción de las interacciones piRNA-mRNA y de las dianas potenciales en los mRNA para cada piRNA en función de la complementariedad de secuencias. -Validación experimental de la interacción mediante tratamientos con piRNA sintético o oligonucleótido antisentido para el incremento o la reducción, respectivamente, de los niveles del piRNA y estudio de los niveles de los mRNAs presuntamente regulados por éste. -Establecimiento de una plataforma para el desarrollo de insecticidas basados en piRNAs. Co-IP del proyecto: Maria Dolors Piulachs.