Fluorescence polarization/anisotropy

Descripción de la prestación

Las medidas de anisotropía de fluorescencia permiten obtener información sobre el tamaño y forma de una molécula o su rigidez, de forma que se pueden estudiar asociaciones entre macromoléculas o fluidez de membranas, entre otras. En el servicio disponemos de un espectrofluorímetro modular Fluorolog (Jobin Yvon -Spex). El equipo cuenta con polarizadores, la temperatura del soporte de la cubeta se controla con un peltier. Se pueden también tomar medidas en tiempo real.

Descripción de la prestación

Las medidas de intensidad y anisotropía/polarización de fluorescencia permiten la detección y cuantificación de interacciones moleculares, incluyendo aquellas en las que participan proteínas, ácidos nucleicos, péptidos y ligandos, con alta sensibilidad y bajo consumo de muestra. La anisotropía es especialmente adecuada para este propósito, dado que depende del volumen molecular y, por lo tanto, es sensible a cambios de tamaño que tienen lugar al formarse los complejos. La alta sensibilidad de estas medidas (picomolar), posibilita la evaluación de interacciones de alta afinidad en condiciones de equilibrio. Utilizando lectores de placas, las medidas pueden realizarse rápida y simultáneamente en cientos de muestras de bajo volumen (unos pocos microlitros), lo que abre la puerta al desarrollo de ensayos sistemáticos de interés en biotecnología y biomedicina. El servicio ofrece el uso, asistido por personal de la Unidad, de un lector de placas Spark® Multimode (Tecan) equipado con polarizadores para medir anisotropía y con filtros para la selección de longitudes de onda [Ex: 360 (35), 485 (20), 530 (25), 560 (20), 620 (20). Em: 340 (20), 465 (35), 535 (25), 595 (35), 620 (20), 680 (30)].