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Transgenesis: Microinyección de embriones de ratón
| Unidad de servicio | Información de la unidad de servicio | Prestación seleccionada | Otras prestaciones de servicio |
|---|---|---|---|
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TRANSGENESIS Y EDICIÓN GENÉTICA CNB - Madrid |
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SERVICIO DE TRANSGENESIS Y BIOTECNOLOGIA REPRODUCTIVA IBV - Valencia |
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CBM - Madrid |
Datos Generales del Servicio
- Unidad de servicio: TRANSGENESIS Y EDICIÓN GENÉTICA
- Instituto: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGIA
- Localidad: Madrid (Madrid)
- Web del servicio: http://www.cnb.csic.es/index.php/en/servicios/108-transgenesis.html
El servicio de transgenesis es una unidad compartida entre el CNB y CBMSO e integrada en el Campus Internacional de Excelencia UAM+CSIC. Su mision es apoyar a los grupos de investigación en la creación establecimiento o intercambio de estirpes de raton genéticamente alteradas. La unidad ofrece asesoramiento cientifico y técnico para la obtención del modelo de raton mas adecuado, bien por transgénesis aditiva o mutagénesis dirigida (modelos KO, KI o condicionales) con células ES o mediante edicion genetica (CRISPR). La unidad también realiza rederivaciones sanitarias para incorporar lineas procedentes de intercambios cuyo estado sanitario impide la entrada directa, genotipaciones bajo demanda, edicion genetica de lineas celulares y obtencion de embriones y líneas ES. Se cuenta con un laboratorio de microinyección y electroporacion, laboratorio de cultivo de células ES y laboratorio de biologia molecular, asi como espacio asignado en los animalarios de ambos centros CNB y CBMSO.
Transgenesis: Microinyección de embriones de ratón
Descripción de la prestación
El proceso de microinyeccion de embriones en 1 célula permite crear modelos animales mediante la incorporacion de ADN o la utilizacion de la tecnología CRISPR/Cas9. En el primer caso el modelo se genera por transgenesis aditiva, inyectando en los pronúcleos soluciones de DNA plasmidico. La eficiencia del proceso depende del fondo genetico del embrion y del tamaño y caracteristicas del DNA. No se recomienda la utilizacion de transgenes superiores a 12-15 Kb. En el caso de utilizar la tecnologia CRISPR /Cas9, la inyeccion se puede realizar en el citoplasma o el pronúcleo dependiendo de las caracteristicas del proyecto Esta prestacion incluye solamente los consumibles y el tiempo necesario para la obtencion de los embriones y su microinyeccion. A partir de 120 embriones se cobra un suplemento por requerir un mayor tiempo y agujas de inyeccion. La prestacion no incluye los animales utilizados como donantes que se tarifan en una variante específica. En algunos casos el solicitante requiere la inyeccion en un fondo específico, por lo que se contempla la posibilidad de cargar exclusivamente los gastos de manipulacion de las hembras, es decir el alojamiento, la superovulacion y los cruces. El servicio no garantiza en ningun caso la obtencion de fundadores o animales con edicion genética, ya que ello depende de factores totalmente ajenos al servicio. Este siempre cobrara los fungibles utilizados independientemente de los resultados.| Opciones | Unidad | Sector Público | Otros Clientes |
|---|---|---|---|
| Hembra donante proporcionada por el Servicio | unidad | 61.06 € | 66.87 € |
| Hormonacion hembra donante | unidad | 9.98 € | 10.93 € |
| Microinyeccion en 1 célula (hasta 120 embriones) | Sesión | 270.52 € | 296.29 € |
| Microinyeccion hasta 50 embriones adicionales | lote | 36.03 € | 39.46 € |
Otras prestaciones de servicio
- Amplificación por PCR
- Asesoramiento y formación
- Preparación, purificación o cuantificación de muestras de DNA y RNA
- Cultivo celular
- Obtención de embriones de ratón en fases de preimplantación
- Transferencia de embriones de ratón
- Fecundación in vitro
- Microinyección de células ES
- Electroporación de vectores de targeting en células ES
- Animales de experimentación: Producción
- Animales de experimentación: Manipulación
- Rederivación aséptica por transferencia de embriones.
Datos Generales del Servicio
- Unidad de servicio: SERVICIO DE TRANSGENESIS Y BIOTECNOLOGIA REPRODUCTIVA
- Instituto: INSTITUTO DE BIOMEDICINA DE VALENCIA
- Localidad: Valencia (Valencia)
- Web del servicio: http://www.ibv.csic.es
El Servicio de Transgénesis y Biotecnología Reproductiva del Instituto de Biomedicina de Valencia ofrece servicio interno y externo para la criopreservación y rederiva de líneas transgénicas ya generadas. Para ello cuenta con un laboratorio polivalente y una sala de manipulación de embriones que consta de mesa antivibratoria, microscopio investido con 2 micromanipuladores, un sistema femtojet de impulsión, 2 estereomicroscopios y un incubador CO2. Dispone de una sala de estabulación para el mantenimiento de las líneas base de animales (cepas C57BL/6J, C75BL/6JRccHsd, DBA/2J, RjOrl:SWISS). La estabulación de los animales se realiza en cubeta abierta con tapa filtro. Se dispone de procedimientos normalizados de trabajo para mantener esta zona en condiciones lo más SPF posibles (lecho y pienso irradiado, esterilización química del material, acceso restringido del personal).
Transgenesis: Microinyección de embriones de ratón
Descripción de la prestación
El servicio presta apoyo a solicitantes internos (CSIC) y externos, públicos y privados. El solicitante se debe poner en contacto con el servicio que evaluará cuál es la mejor estrategia para obtener el modelo animal necesario para los objetivos que se precisan. Tras esta evaluación se aportará al solicitante información sobre los costes del servicio que el usuario deberá de aceptar antes de iniciar el trabajo. El Servicio cuenta con un proyecto autorizado de acuerdo con el RD 53/2013 para llevar a cabo el procedimiento de microinyeccion pero el solicitante deberá confirmar por escrito que está en posesión del correspondiente proyecto autorizado para utilizar el modelo que genere el servicio para su posterior caracterización de acuerdo con el mencionado RD 53/2013 El servicio usa embriones de las cepas B6D2JRccHsd o B6JRccHsd. El coste del animal dependerá de la cepa y será incluido en el presupuesto final aportado al solicitante atendiendo al precio del mantenimiento interno de las cepas en nuestro estabulario. Se pueden utilizar otros fondos genéticos si el usuario lo solicita, aunque deberá hacer frente a un coste adicional. Para transgénesis aditiva el solicitante deberá proporcionar el transgen o el vector de mutación y una estrategia de genotipaje puesta a punto. El servicio se compromete a la inyección de un mínimo de 300 embriones. El servicio ofrece la posibilidad de llevar a cabo el genotipado de los fundadores a partir de los cebadores proporcionados por el solicitante que supondrá un coste adicional. El servicio no garantiza número de fundadores, ni trasmisión o expresión de la construcción. En mutagenesis dirigida, el servicio ofrece la posibilidad de generar modelos KO,KI y condicionales mediante edición genética (CRISPR/Cas9) solo a usuarios CSIC a causa de la patente vigente de la tecnología.| Opciones | Unidad | Sector Público | Otros Clientes |
|---|---|---|---|
| microinyeccion | Sesión | 405.59 € | 444.22 € |
Datos Generales del Servicio
- Unidad de servicio: EDICIÓN GENÉTICA DE RATÓN
- Instituto: CENTRO DE BIOLOGIA MOLECULAR SEVERO OCHOA
- Localidad: Madrid (Madrid)
- Web del servicio: http://www.cbm.csic.es
El servicio de edición genética de ratón es una unidad compartida entre el CNB y CBMSO e integrada en el Campus Internacional de Excelencia UAM+CSIC. Su misión es apoyar a los grupos de investigación en la creación de líneas de ratón genéticamente alteradas. La unidad ofrece asesoramiento científico y técnico para la obtención del modelo de ratón más adecuado, bien por transgénesis aditiva o mutagénesis dirigida (modelos KO, KI o condicionales) con células ES o mediante edición genética (CRISPR). La unidad también da apoyo al animalario del CBM en rederivaciones sanitarias para incorporar lineas procedentes de intercambios cuyo estado sanitario impide la entrada directa, genotipaciones bajo demanda, edición genética de líneas celulares y obtención de embriones y líneas ES. Se cuenta con un laboratorio de microinyección y electroporacion, laboratorio de cultivo de células ES y laboratorio de biología molecular, así como espacio asignado en los animalarios de ambos centros CNB y CBM
Transgenesis: Microinyección de embriones de ratón
Descripción de la prestación
El proceso de microinyeccion de embriones en 1 célula permite crear modelos animales mediante la incorporacion de ADN o la utilizacion de la tecnología CRISPR/Cas9. En el primer caso el modelo se genera por transgenesis aditiva, inyectando en los pronúcleos soluciones de DNA plasmidico. La eficiencia del proceso depende del fondo genetico del embrion y del tamaño y caracteristicas del DNA. No se recomienda la utilizacion de transgenes superiores a 12-15 Kb. En el caso de utilizar la tecnologia CRISPR /Cas9, la inyeccion se realiza en el citoplasma. Esta prestacion incluye solamente los consumibles y el tiempo necesario para la obtencion de los embriones y su microinyeccion. A partir de 120 embriones se cobra un suplemento por requerir un mayor tiempo y agujas de inyeccion. La prestacion no incluye los animales utilizados como donantes que se tarifan en una variante especófica. En algunos casos el solicitante requiere la inyeccion en un fondo específico, por lo que se contempla la posibilidad de cargar excluisivamente los gastos de manipulacion de las hembras, es decir el alojamiento, la superovulacion y los cruces. El servicio no garantiza en ningun caso la obtencion de fundadores o animales con edicion genética, ya que ello depende de factores totalmente ajenos al servici. Este siempre cobrara los fungibles utilizados independientemente de los resultados.| Opciones | Unidad | Sector Público | Otros Clientes |
|---|---|---|---|
| hormonacion hembra donante | € / animal | 9.98 € | 10.93 € |
| microinyeccion hasta 50 embriones adicionales | lote | 36.03 € | 39.46 € |
| Microinyeccion en 1 célula (hasta 120 embriones) | Sesión | 270.52 € | 296.29 € |
| hembra proporcionada por el servicio | animal | 61.06 € | 66.87 € |
Otras prestaciones de servicio
- Amplificación por PCR
- Asesoramiento y formación
- Preparación, purificación o cuantificación de muestras de DNA y RNA
- Cultivo celular
- Obtención de embriones de ratón en fases de preimplantación
- Transferencia de embriones de ratón
- Fecundación in vitro
- Microinyección de células ES
- Electroporación de vectores de targeting en células ES
- Animales de experimentación: Producción
- Animales de experimentación: Manipulación